PerCP-Konjugate für die Durchflusszytometrie

Bei Dianova erhalten Sie jetzt die neuen PerCP-Konjugate der bewährten Sekundärantikörper von Jackson ImmunoResearch, USA.

Dinoflagellaten besitzen einen fluoreszierenden Peridinin-Chlorophyll (PerCP)-Komplex. Die von uns eingesetzte 35,5kDa-Form aus Dinophyceae sp. zeigt ein breites Anregungsspektrum mit einem Maximum bei 472nm und einem Emissionsmaximum bei 677nm (Bild 1).

Abb. 1 Anregungs- (blau) und Emissions- (lila) Spektren PerCP-konjugierter und affinitätsgereinigter Sekundärantikörper von Jackson ImmunoResearch. Die Kurvenhöhen wurden normalisiert und eignen sich nicht für einen quantitativen Vergleich (Spektren wurden mit dem Spektrofluorometer-System, M-Serie, von Photon Technology aufgenommen).

Abb. 2 Humane periphäre Lymphozyten wurden entweder direkt mit PerCP-konjugiertem anti-CD3 (orange) von BioLegend oder indirekt mit Biotin-konjugiertem anti-CD3 (B-D Pharmingen) und PerCP-Streptavidin von Jackson ImmunoResearch (blau), BioLegend (lila) oder B-D Pharmingen (rot) angefärbt.

Anregungs- (blau) und Emissions- (lila) Spektren PerCP-konjugierter und affinitätsgereinigter Sekundärantikörper. Die Kurvenhöhen wurden normalisiert und eignen sich nicht für einen quantitativen Vergleich (Analyse der markierten Zellen mit dem Dual-Laser FACSCalibur Durchflusszytometer von Becton-Dickinson).

Abb. 3 Humane periphäre Lymphozyten wurden entweder direkt mit PerCP-konjugiertem anti-CD3 (orange) von BioLegend oder indirekt mit Biotin-konjugiertem anti-CD3 (B-D Pharmingen) und PerCP-Streptavidin von Jackson ImmunoResearch (blau), BioLegend (lila) oder B-D Pharmingen (rot) angefärbt.

Anregungs- (blau) und Emissions- (lila) Spektren PerCP-konjugierter und affinitätsgereinigter Sekundärantikörper. Die Kurvenhöhen wurden normalisiert und eignen sich nicht für einen quantitativen Vergleich (Analyse der markierten Zellen mit dem Dual-Laser FACSCalibur Durchflusszytometer von Becton-Dickinson).

Bild 2:
Das Fluoreszenzsignal ist bei schrittweiser Inkubation eines biotinylierten Primärantikörpers mit PerCP-konjugiertem Streptavidin nahezu gleich stark wie bei direkter Inkubation mit PerCP-markiertem Primärantikörper.
Die Inkubation von unkonjugiertem Primärantikörper mit PerCP-konjugiertem Sekundärantikörper führt zu einem etwas stärkeren Signal.

Bild 3:
Selbst bei einem in der Durchflusszytometrie eher unüblichen dreistufigen Verfahren kann nach sukzessiver Inkubation von unkonjugiertem Primärantikörper, biotinyliertem Sekundärantikörper und PerCP-konjugiertem Streptavidin eine weitere leichte aber deutliche Amplifikation des Signals erreicht werden.

Abb. 4 Anregungsspektren (links) für PerCP (blau), DyLight488/FITC (grün), R-PE (rot) und APC (braun) -konjugierte Sekundärantikörper. Emissionsspektren (rechts) für DyLight488/FITC (grün), R-PE (rosa) und APC (braun) und PerCP (lila) -konjugierte Sekundärantikörper von Jackson ImmunoResearch. Die Kurvenhöhen wurden normalisiert und eignen sich nicht für einen quantitativen Vergleich (Spektren wurden mit dem Spektrofluorometer-System, M-Serie, von Photon Technology aufgenommen).

PerCP, DyLight 488 (oder FITC) und R-PE -Antikörperkonjugate können bei 488 nm mit dem Argon Laser angeregt werden und eignen sich deshalb für 1 bis 3-Farbenanalysen im "Single-Flow"-Durchflusszytometer. Eine 4. Farbe kann durch Anregung von APC und DyLight 649 -Antikörperkonjugaten können bei 633 oder 635 nm im Dual-Laser Durchflusszytometer hinzukommen (Bild 4).

Sekundärantikörperkonjugate für die Durchflusszytometrie

Für die Durchflusszytometrie bieten wir 3 fluoreszierende Proteine (R-PE, APC und PerCP), 3 Fluoreszenzfarbstoffe (DyLight488, FITC und DyLight649) sowie Biotin-SP in Konjugation an Streptavidin und an unsere bewährten und hochadsorbierten Antikörper von Jackson ImmunoResearch.

Direktmarkierte Primärantikörper für die Durchflusszytometrie

Durch unseren Partner Immunostep verfügen wir über exzellente direkt-markierte Antikörper gegen humane CD-Antigene. Wir bieten ein breites Portfolio an CD-Markern in Konjugation mit PerCP, FITC, PE, APC, PECy5 u.a., erhältlich als ein-, zwei- oder dreifarbige Reagenzien.