Anti-Maus CD31 / Klon SZ31 für formalin-fixiertes Paraffingewebe

Der Antikörper Klon SZ31 reagiert als erster Antikörper spezifisch mit CD31 in standardmässig Formalin-fixierten Paraffin-eingebetteten (FFPE) Mausgeweben.

CD31, auch bekannt als PECAM-1 (Platelet Endothelial Cell Adhesion Molecule-1) wird auf der Oberfläche embryonaler und adulter Endothelzellen konstitutiv exprimiert. Die Expression zeigt sich auch auf der Oberfläche von Monozyten, Neutrophilen, Blutplättchen und bestimmten T-Zell Populationen. CD31 wurde auch auf Knochenmark-stämmigen haematopoetischen Stammzellen und auf embryonalen Stammzellen nachgewiesen. Bei CD31 handelt es sich um ein 130kDa integrales Membran-Glycoprotein, das als Mitglied der Immunoglobulin-Superfamilie eine Rolle bei der Vermittlung der Zell-Zell-Adhäsion spielt. Die CD31-vermittelten Endothelzell-Interaktionen sind von besonderer Bedeutung für die Angiogenese. Diverse Studien weisen CD31 als wichtigsten Marker in der humanen Angiogenese aus und deuten auf seine Rolle für die Vorhersage des Wiederauftretens von Tumoren.

Pathophysiologische Studien von CD31 in Maus-Modellsystemen waren bisher nur begrenzt möglich, weil  Standard-FFPE Gewebe ausgeschlossen werden mussten. Der Ratten-Klon SZ31 löst diese Probleme, denn er erlaubt erstmals immunhistochemische Analysen von CD31 in standardmässig Formalin-fixierten Paraffingeweben der Maus in beeindruckender Qualität.

Produktdetails:   Klon SZ31 als "Goldstandard" für Angiogenesestudien im Mausmodell

A-R: Immunhistochemische Färbung von murinem CD31 (PECAM-1) in standardmässig Formalin-fixierten Paraffin-eingebetteten Gewebeschnitten nach Standard-Protokoll für die indirekte HRPO (Horseradish Peroxidase)-Methode, Gegenfärbung mit Hämatoxylin.

Der Antikörper Klon SZ31 reagiert spezifisch mit Endothelzellen in Gefäßen und Kapillaren folgender Mausgewebe:
A: Aorta
B: Aortenursprung
C: Endokardium
D-G: Dünndarm
H: Dickdarm
I: Gehirn
J-L: Lymphknoten
M: Knochenmark
N-O: Mesenteriale Gefäße
P: Niere
Q-R: Pankreas

(Bilder mit freundlicher Genehmigung von  Prof. Dr. Robert Klopfleisch, Institut für Tierpathologie, Freie Universität Berlin, Berlin)

A-F: Immunhistochemische Färbung von murinem CD31 (PECAM-1) in standardmässig Formalin-fixierten Paraffin-eingebetteten Gewebeschnitten nach Standard-Protokoll für die indirekte alkalische Phosphatase Methode, Gegenfärbung mit Hämatoxylin-Papanicolaou.
Der Antikörper Klon SZ31 reagiert spezifisch mit Endothelzellen in Gefäßen und Kapillaren folgender Mausgewebe:
A: Lunge
B: Skelettmuskel
C: Rückenmark
D: Leber
E-F: Adenokarzinom

 Western Blot Analyse: Immunoblot mit Extrakten aus Maus-Lunge, J558L Zellen und m-Lend Zellen mit dem anti-CD31 Antikörper Klon SZ31 aus Ratte (#DIA-310 1:5.000) und Ziege anti-Ratte-HRP Antikörper (1:10.000)

Spur:
1 J558 Zellen (CD31-), 25µg Lysat
2 Maus-Lunge, 25µg Lysat
3 Leerwert
4 m-Lend Zellen (CD31+), 12.5µg Lysat

(Bilder mit freundlicher Genehmigung von  Prof. Dr. Harald Stein, Institut für Pathologie, Charité Campus Benjamin Franklin, Berlin)

Hinweise zur Anwendung

Für die immunhistochemischen Färbungen eignen sich verschiedene Detektionsmethoden, wie z.B. Avidin-Biotin-alkalische Phosphatase (ABAP), Alkalische Phosphatase anti-alkalische Phosphatase (APAAP) oder Horseradish Peroxidase (HRP) -Techniken.
Immunhistochemische Färbung standardmässig Formalin-fixierter Paraffin-Gewebe nach der indirekten alkalischen Phosphatase Methode:

1. Deparaffinierung der FFPE-Mausgewebeschnitte nach Standardprotokoll mit Xylol/Ethanol
2. Antigen Demaskierung: Hohes Erhitzen der Gewebschnitte in Zitrat-Puffer pH 6,0 nach Standardprotokoll
3. Blockieren mit 5% Kaninchen-Serum, 10 min RT
4. Waschen mit TBS, 3 x 5 min
5. Inkubieren mit Antikörper Klon SZ31 (1:10-1:20), 30min RT
6. Waschen mit TBS, 3 x 5 min
7. Inkubieren mit Kaninchen anti-Ratte IgG (H+L) alkalische Phosphatase (1:200), 30min RT
8. Waschen mit TBS, 3 x 5 min
9. Substrat zugeben, Neufuchsin, 30min RT
10. Gegenfärbung mit Hematoxylin-Papanicolaou

Referenzen

1. Hölscher M, Silter M, Krull S, von Ahlen M, Hesse A, Schwartz P, Wielockx B, Breier G, Katschinski DM, Zieseniss A. Cardiomyocyte-specific prolyl-4-hydroxylase domain 2 knock out protects from acute myocardial ischemic injury. J.Biol.Chem. 286: 11185-11194, 2011
2. Kröger C, Vijayaraj P, Reuter U, Windoffer R, Simmons D, Heukamp L, Leube R, Magin TM. Plceental vasculogenesis is regulated by keratin-mediated hyperoxia in murine decidual tissues. Am.J.Pathol. 178(4): 1587-1590, 2011