FAQ: Verdünnung von Sekundärantikörpern

Sekundärantikörper von Jackson ImmunoResearch werden mit der höchsten Verdünnung in Immunoassays eingesetzt. Unsere Empfehlungen für den erfolgreichen Einsatz in ELISA, Western Blot, Histo- / Cytochemie und Durchflusszytometrie (FACS) haben wir in folgenden Übersicht zusammengestellt. Da die optimale Verdünnung von unterschiedlichen Faktoren abhängen kann, sollte jeder Anwender die richtige Gebrauchsverdünnung für sein Experiment empirisch bestimmen.

Sekundärantikörper
ProduktKonjugatELISAWestern BlotHisto- / CytochemieDurchflusszytometrie
Gesamt IgG und F(ab’)2Unkonjugiert10 - 20 µg/ml10 - 20 µg/ml10 - 20 µg/ml10 - 20 µg/ml
FabUnkonjugiert20 - 40 µg/ml20 - 40 µg/ml20 - 40 µg/ml20 - 40 µg/ml
Gesamt IgG, F(ab’)2 und FabAlexa Fluor 488, 594, 647 und Cy31:100 - 1:8001:100 - 1:800
Gesamt IgGAlexa Fluor 680 und 7901:50.000 - 1:200.000
Gesamt IgGBV421 und BV4801:50 - 1:2001:50 - 1:200
Gesamt IgG, F(ab’)2 und FabAMCA, Cy2, FITC, TRITC, RRX1:50 - 1:2001:50 - 1:200
Gesamt IgGCy51:100 - 1:4001:100 - 1:400
Gesamt IgG und F(ab’)2R-PE und APC1:50 - 1:200
Gesamt IgG und F(ab’)2PerCP1:25 - 1:100
Gesamt IgG und F(ab’)2Horseradish Peroxidase (HRP)1:5.000 - 1:100.0001:5.000 - 1:100.000 ; 1:10.000 - 1:200.000 (ECL)1:200 - 1:5.000
Gesamt IgG und F(ab’)2Alkalische Phosphatase1:5.000 - 1:50.0001:5.000 - 1:50.000
Gesamt IgG, F(ab’)2 und FabBiotin (mit Fluorophor-konjugierten Streptavidin)1:200 - 1:1.0001:200 - 1:1.000
Gesamt IgG und F(ab’)2Biotin (mit Enzym-konjugierten Streptavidin)1:20.000 - 1:40.0001:20.000 - 1:40.0001:500 - 1:5.0001:200 - 1:1.000
Streptavidin
ProduktKonjugatELISAWestern BlotHisto- / CytochemieDurchflusszytometrie
StreptavidinR-PE und APC1:50 - 1:200
StreptavidinPerCP1:25 - 1:100
StreptavidinHorseradish Peroxidase (HRP)1 - 2 µg/ml1 - 2 µg/ml ; 0,01 - 1 µg/ml (ECL)1 - 2 µg/ml
StreptavidinAlkalische Phosphatase1 - 2 µg/ml1 - 2 µg/ml ; 0,1 - 1 µg/ml (ECL)1 - 2 µg/ml
StreptavidinAlle Alexa Fluor, DyLight 405 und Cy30,5 - 2 µg/ml0,5 - 2 µg/ml
StreptavidinCy51 - 4 µg/ml1 - 4 µg/ml
StreptavidinAlle weiteren Fluorophore2 - 5 µg/ml2 - 5 µg/ml
Weitere Produkte
ProduktELISAWestern BlotHisto- / CytochemieDurchflusszytometrie
4nm Colloidal Gold-Antikörper Komplex1:20 - 1:200
6nm, 12 Colloidal Gold-Antikörper Komplex1:20 - 1:40
18nm Colloidal Gold-Antikörper Komplex1:10 - 1:20
Peroxidase-Anti-Peroxidase (PAP)1:5.000 - 1:50.0001:5.000 - 1:50.00025 - 50 µg/ml, 1:400 - 1:800
ChromPure10 µg/ml
Serum

Für die Blockierung von Hintergrundsignalen mit Normalseren empfehlen wir 5% v/v.