Sekundärantikörper von Jackson ImmunoResearch werden mit der höchsten Verdünnung in Immunoassays eingesetzt. Unsere Empfehlungen für den erfolgreichen Einsatz in ELISA, Western Blot, Histo- / Cytochemie und Durchflusszytometrie (FACS) haben wir in folgenden Übersicht zusammengestellt. Da die optimale Verdünnung von unterschiedlichen Faktoren abhängen kann, sollte jeder Anwender die richtige Gebrauchsverdünnung für sein Experiment empirisch bestimmen.
Sekundärantikörper
Produkt
Konjugat
ELISA
Western Blot
Histo- / Cytochemie
Durchflusszytometrie
Gesamt IgG und F(ab’)2
Unkonjugiert
10 – 20 µg/ml
10 – 20 µg/ml
10 – 20 µg/ml
10 – 20 µg/ml
Fab
Unkonjugiert
20 – 40 µg/ml
20 – 40 µg/ml
20 – 40 µg/ml
20 – 40 µg/ml
Gesamt IgG, F(ab’)2 und Fab
Alexa Fluor 488, 594, 647 und Cy3
1:100 – 1:800
1:100 – 1:800
Gesamt IgG
Alexa Fluor 680 und 790
1:50.000 – 1:200.000
Gesamt IgG
BV421 und BV480
1:50 – 1:200
1:50 – 1:200
Gesamt IgG, F(ab’)2 und Fab
AMCA, Cy2, FITC, TRITC, RRX
1:50 – 1:200
1:50 – 1:200
Gesamt IgG
Cy5
1:100 – 1:400
1:100 – 1:400
Gesamt IgG und F(ab’)2
R-PE und APC
1:50 – 1:200
Gesamt IgG und F(ab’)2
PerCP
1:25 – 1:100
Gesamt IgG und F(ab’)2
Horseradish Peroxidase (HRP)
1:5.000 – 1:100.000
1:5.000 – 1:100.000 ; 1:10.000 – 1:200.000 (ECL)
1:200 – 1:5.000
Gesamt IgG und F(ab’)2
Alkalische Phosphatase
1:5.000 – 1:50.000
1:5.000 – 1:50.000
Gesamt IgG, F(ab’)2 und Fab
Biotin (mit Fluorophor-konjugierten Streptavidin)
1:200 – 1:1.000
1:200 – 1:1.000
Gesamt IgG und F(ab’)2
Biotin (mit Enzym-konjugierten Streptavidin)
1:20.000 – 1:40.000
1:20.000 – 1:40.000
1:500 – 1:5.000
1:200 – 1:1.000
Streptavidin
Produkt
Konjugat
ELISA
Western Blot
Histo- / Cytochemie
Durchflusszytometrie
Streptavidin
R-PE und APC
1:50 – 1:200
Streptavidin
PerCP
1:25 – 1:100
Streptavidin
Horseradish Peroxidase (HRP)
1 – 2 µg/ml
1 – 2 µg/ml ; 0,01 – 1 µg/ml (ECL)
1 – 2 µg/ml
Streptavidin
Alkalische Phosphatase
1 – 2 µg/ml
1 – 2 µg/ml ; 0,1 – 1 µg/ml (ECL)
1 – 2 µg/ml
Streptavidin
Alle Alexa Fluor, DyLight 405 und Cy3
0,5 – 2 µg/ml
0,5 – 2 µg/ml
Streptavidin
Cy5
1 – 4 µg/ml
1 – 4 µg/ml
Streptavidin
Alle weiteren Fluorophore
2 – 5 µg/ml
2 – 5 µg/ml
Weitere Produkte
Produkt
ELISA
Western Blot
Histo- / Cytochemie
Durchflusszytometrie
4nm Colloidal Gold-Antikörper Komplex
1:20 – 1:200
6nm, 12 Colloidal Gold-Antikörper Komplex
1:20 – 1:40
18nm Colloidal Gold-Antikörper Komplex
1:10 – 1:20
Peroxidase-Anti-Peroxidase (PAP)
1:5.000 – 1:50.000
1:5.000 – 1:50.000
25 – 50 µg/ml, 1:400 – 1:800
ChromPure
10 µg/ml
Serum
Für die Blockierung von Hintergrundsignalen mit Normalseren empfehlen wir 5% v/v.
