Alpaka VHH Single Domain Antikörper (Nanobodies) und Sekundärantikörper aus Alpaka

Aus Alpaka stammende Sekundärnantikörper von Jackson ImmunoResearch sind in verschiednen varianten erhältlich, einerseits als als polyklonaler Gesamtcocktail und VHH Single Domain Antikörper (Nanobodies).

Mit den Sekundärantikörpern aus dem Alpaka (Vicugna pacos), erweitern wir unser Angebot an Detektionsantikörpern. Immunglobuline aus dem Alpaka eignen sich unter anderem für Mehrfachmarkierungen, wenn Antikörper aus dem Esel oder der Ziege, aufgrund von Kreuzreaktivitäten, nicht in Frage kommen. Alpaka gehören zusammen mit dem Lama zur Familie der Camelidae, die unter den Säugetieren einzigartige IgG-Subklassen besitzen. Im Serum dieser Tiere befindet sich neben dem konventionellen IgG1 (klassischer Aufbau), IgG2 und IgG3. Diese besitzen weder leichte Ketten noch CH1 Domänen in den schweren Ketten (Abb.1). Die Schwere-Ketten-Antikörper haben eine geringe Größe, sind äußerst stabil und zeigen eine hohe Spezifität und Affinität zum jeweiligen Antigen.

Abb.1: Schematische Darstellung eines klassischen IgG mit zwei leichten- und zwei schweren Ketten (links), und eines Alpaka IgG2/ IgG3 ohne leichte Ketten oder CH1 Domäne (mitte) und eines VHH Single Domain Antibodies (Nanobodies) (rechts).

Single Domain -VHH-Antikörper (Nanobodies) von Jackson ImmunoResearch.

Von Kameliden abgeleitete VHH- oder Single-Domain-Antikörper (die auch als Nanokörper bezeichnet werden) bieten Vorteile für Anwendungen wie Super-Resolution Imaging, da sie aufgrund ihrer geringen Größe hervorragend in das Gewebe eindringen. Durch die Markierung mit Nanokörpern kommt der Nachweisantikörper nahe genug an das Ziel heran, um eine genaue Lokalisierung zu ermöglichen, wodurch der mit der Markierung mit herkömmlichen Antikörpern verbundene Lokalisationsfehler (Linkage Error) verringert wird.

Jackson ImmunoResearch Single-Domain-VHH-Antikörper sind derzeit als Anti-Maus-, Anti-Kaninchen- und Anti-Mensch-Antikörper erhältlich, die mit Farbstoffen aus dem Alexa-Fluor-Reihe und anderen häufig verwendeten Sonden konjugiert sind.

Im Gegensatz zu vielen anderen Single-Domain-VHH-Antikörpern, die derzeit erhältlich sind, haben Nanobodies von Jackson ImmunoResearch den zusätzlichen Vorteil, dass sie polyklonal sind. Polyklonale Single-Domain-VHH-Antikörper ermöglichen eine noch bessere Signalverstärkung und haben dabei gleiche Reduzierung des Linkage Errors wie monoklonale Nanobodies

Polyklonale Nano-Sekundärstoffe binden im Vergleich zu monoklonalen Nanokörpern mehr Epitope auf einem primären Antikörper, da sie eine breitere Erkennung haben, aber der Durchmesser des Komplexes bleibt vergleichbar, wobei der Abstand zwischen der Sonde und dem Zielprotein ähnlich ist (Schema von Jackson ImmunoResearch).

Alpaka Sekundärantikörper

Die polyklonalen Alpaka Sekundärantikörper von Jackson ImmunoResearch bestehen aus einem Gesamtcocktail aller Immunglobulin-Subklassen (IgG1, IgG2 und IgG3) und sind für den Nachweis von Kaninchen IgG (H+L), Maus IgG (H+L) sowie Human IgG (H+L) verfügbar. Die Sekundärantikörper sind für den gleichzeitigen Einsatz von bovinen Blockierungsreagenzien geeignet. Damit es nach einem BSA-Blockierungsschritt nicht zu einer unspezifischen Hintergrundfärbung kommt, sind alle Antikörper gegen Proteine aus dem Rinderserum präadsorbiert. Die Alpaka Antikörper eignen sich konjugiert an unterschiedliche Farbstoffe für die Mehrfachmarkierung von Kaninchen, Maus oder Humanen Primärantikörpern. Anti-Alpaka Antikörper finden Sie hier.

Sekundärantikörper aus dem Alpaka sind mit folgenden Konjugaten erhältlich:

•    Unkonjugiert
•    Horseradish Peroxidase
•    Alkaline Phosphatase
•    Biotin
•    DyLight™ 405
•    AMCA
•    Cy™ 2
•    Alexa Fluor® 488
•    Fluorescein (FITC)
•    Cy™ 3
•    Rhodamine (TRITC)
•    Alexa Fluor® 594
•    Rhodamine Red-X™
•    Alexa Fluor® 647
•    Cy™ 5


Referenzen:

  • Hamers-Casterman, C., T. Atarhouch, S. Muyldermans, G. Robinson, C. Hamers, E.B. Songa, N. Bendahman, and R. Hamers. 1993. Naturally occurring antibodies devoid of light chains. Nature. 363:446–448
  • De Genst E, Saerens D, Muyldermans S, Conrath K. Antibody repertoire development in camelids. Dev Comp Immunol (2006) 30:187–98.10.1016/j.dci.2005.06.010
  • Maass DR, Sepulveda J, Pernthaner A, Shoemaker CB. Alpaca (Lama pacos) as a convenient source of recombinant camelid heavy chain antibodies (VHHs). J Immunol Methods (2007) 324:13–25.10.1016/j.jim.2007.04.008